La détection coloscopique de la muqueuse colique était significativement plus élevée chez les patients porteurs de tumeurs que chez les patients témoins de coloscopie et universelle dans le cancer colorectal tardif CRC bft- était l’isotype le plus fréquent identifié, et plusieurs isotypes de Bft étaient plus souvent présents chez les patients CRC

Contexte Bactéroides fragilis ETBF produit la toxine Bacteroides fragilis, qui a été associée à une maladie diarrhéique aiguë, une maladie intestinale inflammatoire et un cancer colorectal CRC ETBF induit une cancérogenèse colique dans des modèles expérimentaux Des études humaines antérieures ont démontré une colonisation fécale asymptomatique fréquente avec ETBF, mais aucune étude Méthodes Nous avons comparé la présence du gène bft dans des échantillons muqueux de patients atteints de néoplasie colorectale, n = à un groupe témoin subissant une coloscopie ambulatoire pour le dépistage du CRC ou des contrôles de diagnostic, n = colonies bactériennes simples La muqueuse des cas était significativement plus souvent positive pour les tissus gauches% et droite% et / ou les tissus normaux appariés que pour les biopsies témoins gauche et droite. %; P = et%; P =, respectivement La détection de bft était concordante dans la plupart des échantillons de muqueuses appariés de cas individuels ou témoins% cas; Témoins en% Il y avait une tendance à l’augmentation de la positivité en bft dans la muqueuse chez les patients CRC tardifs vs précoces% vs%, respectivement; P = Contrairement à la maladie diarrhéique ETBF où domine la détection bft, bft- était l’isotype toxine le plus fréquemment identifié dans les deux cas et chez les témoins, alors que plusieurs isotypes bft étaient détectés plus fréquemment dans les cas P ≤ Conclusions Le gène bft est associé à la néoplasie colorectale , en particulier à la fin du CCR Nos résultats suggèrent que l’exposition de la muqueuse bft est fréquente et peut être un facteur de risque pour le développement de la CRC

L’anaérobie Bacteroides fragilis est un symbiote colique commun avec une affinité pour la colonisation muqueuse, mais est également connu pour ne comprendre qu’une petite proportion du microbiote Il y a de nombreuses années, l’ETBF était responsable des maladies diarrhéiques affectant le bétail et les humains L’ETBF est désormais reconnu comme une cause de maladies diarrhéiques dans tous les groupes d’âge à l’échelle mondiale, la plupart des rapports signalent que l’ETBF est responsable des maladies diarrhéiques. se concentrer sur les jeunes enfants Des données limitées soutiennent également une association de ETBF avec maladie intestinale inflammatoire active IBD et le cancer colorectal CRC Semblable à d’autres pathogènes entériques, la colonisation asymptomatique ETBF est détectée chez les enfants et les adultes avec des taux de portage élevés en% dans les échantillons fécaux d’adultes sains La pathogénicité de l’ETBF est due à la toxine B fragilis BF T, une toxine de métalloprotéase dépendante du zinc kDa avec des isotypes BFT-, BFT- et BFT- L’analyse de séquence indique que le gène bft est unique et, depuis qu’il a été cloné dans , seulement identifié dans B fragilis BFT in vitro se lie à des voies de signalisation Wnt et NF-κB activant le récepteur épithélial du côlon avec prolifération cellulaire accrue, libération épithéliale de médiateurs pro-inflammatoires et induction de lésions de l’ADN [, -] ETBF in vivo, mais pas NTBF, induit une colite aiguë et chronique BFT-dépendante dans CBL / souris Dans la néoplasie intestinale multiple MinApc / – souris, un modèle pour la CRC humaine, ETBF favorise la carcinogenèse IL – dépendante interleukine Ces données suggèrent que ETBF est un agent étiologique candidat dans les CRCT sporadiques humaines en outre adresser le rôle de ETBF Dans la pathogenèse de la CRC humaine, la caractérisation de l’exposition de la muqueuse au thon rouge est critique car l’exposition muqueuse à long terme est supposée contribuer à la transformation néoplasique du côlon. Nous présentons ici de nouvelles données sur la détection. du gène Bft, déterminant de la virulence critique de l’ETBF, dans des échantillons de muqueuse provenant de cas de patients atteints de néoplasie colorectale comparés à des individus subissant des contrôles de coloscopie ambulatoire

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Population de patients

Patients adultes atteints de néoplasie colorectale = CRC, = adénomes subissant des résections chirurgicales colorectales primaires à l’hôpital Johns Hopkins JHH ont été étudiés entre mai et septembre. Seuls les tissus non nécessaires pour le diagnostic pathologique ont été collectés à la JHH entre août et février pour un dépistage systématique du CRC ou un diagnostic. , pour l’anémie ont également été étudiés

Critère d’exclusion

Les cas ayant reçu une radiothérapie préopératoire et / ou une chimiothérapie ou ayant des antécédents de CCR ou de MII ont été exclus De même, les témoins ayant des antécédents de CCR, de MII ou de chimiothérapie dans les années suivant leur intervention ont été exclus.

Exposition aux antibiotiques

Un sous-ensemble de cas a reçu une préparation intestinale mécanique préopératoire MBP sans ou avec des antibiotiques oraux, le plus souvent néomycine et érythromycine MBP-No Abx vs MBP-Abx Tableau préopératoire Les antibiotiques intraveineux ont été administrés à tous les cas céfotétan ou clindamycine / gentamicine dans l’heure d’incision cutanée. Les protocoles JHH ont été modifiés pour se conformer aux nouvelles lignes directrices sur la prophylaxie des infections chirurgicales préconisant MBP-Abx avant toutes les interventions chirurgicales colorectales pour la prophylaxie des infections du site opératoire. Les antibiotiques oraux ne faisaient pas partie de la coloscopie. Tableau Caractéristiques des cas et des témoins Caractéristiques Tous les cas n = Aucun cas Abx n = Contrôles n = Âge, y, médiane IQRa – – – Male sexb Racec Blanc Afro-américain Autres préparation intestinale Pas de préparation MBP-Non Abx MBP-Abx Indicatio n pour procédure Dépistage NA NA Diagnostic bilan NA NA Tumeur colorectale NA Diagnostic histologique Tumeurs totales NA Adénome tubulaire d Adénome tubulovilleux e NA Adénocarcinome f f NA Stade Ig NA Stade IIg NA Stade IIIg NA Stade IVg NA Tumeur, cm, médiane IQR NA Caractéristiques Tous les cas n = Aucun cas d’Abx n = Contrôles n = Âge, y, médiane IQRa – – – Male sexb Racec Blanc Afro-Américain Autre préparation intestinale Pas de préparation MBP-Non Abx MBP-Abx Indication pour la procédure Dépistage NA NA Diagnostic NA NA Tumeur colorectale NA Diagnostic histologique Tumeurs totales NA Adénome tubulaire d Adénome tubulovilleux e NA Adénocarcinome f f NA NA Stade Stade Ig Ilg NA NA Stade IIIg Stade IVg NA taille de la tumeur, cm, médiane IQR NA Les données sont présentées comme non%, sauf indication contraire specifiedAbbreviations: ABX, antibiotiques; IQR, intervalle interquartile défini comme quartile – quartile; MBP-Abx, préparation intestinale mécanique avec des antibiotiques oraux; MBP-No Abx, préparation intestinale mécanique sans antibiotiques oraux; NA, test non applicable, P = tous les cas et P = aucun cas d’Abx, comparé aux témoins b Test exact de Fisher, P = tous les cas et P = aucun cas d’Abx, comparé au test d’indépendance de contrôle, P = tous les cas et P & lt ; Cas d’Abx non comparés à ceux du groupe témoin Onze des témoins présentaient des adénomes tubulaires enlevés au cours d’une coloscopie Un patient présentant un adénome tubulovilleux Un patient présentant à la fois un adénocarcinome et un adénomag tubulovilleux La répartition par âge était similaire entre les stades I / II et III / IV. P =

Approbation de l’étude

Cette étude a été approuvée par le JIH Institutional Review Board Tous les échantillons ont été obtenus conformément à la Loi sur la transférabilité et la responsabilité en matière d’assurance maladie

Collecte d’échantillons

Des prélèvements de tissu muqueux, ou mm de tumeur appariée et de tissu grossièrement normal Des données supplémentaires ont été recueillies à partir des échantillons chirurgicaux Des paires de tissus proximales ou à partir de la flexion hépatique ont été définies comme côlon droit tandis que des spécimens distaux à la flexion hépatique ont été définis. obtenu à partir du cæcum droit ou du côlon ascendant et / ou du côlon descendant ou sigmoïde gauche en utilisant une pince à biopsie jetable -mm Boston Scientific Corporation Des échantillons chirurgicaux ont été exposés à l’air pendant des minutes avant la collecte des tissus; les biopsies de coloscopie ont été exposées à l’air ≤ secondes

Traitement des tissus

Les paires d’échantillons provenant de cas ou de témoins ont été traitées par les deux approches, ou les deux:

Méthode de colonie unique de bouillon

Des échantillons de tissu ont été placés dans un bouillon de bile de glucose et de levure de peptone, puis dans une chambre anaérobie. Des systèmes Anaerobe à ° C ont été inoculés sur du milieu non sélectif BRU de gélose au sang de BRU; Anaerobe Systems et Bacteroides agar bile esculine BBE Bacteroides sélectif; Becton Dickinson pour obtenir des colonies individuelles environ – heures BRU colonies ont été réisolées sur BBE pour sélectionner les espèces Bacteroides De chaque échantillon, – BBE isolats ont été expansés sur agar de soja tryptique avec% de sang de mouton TSA Anaerobe Systems et testé pour le gène bft

Méthode directe de colonie unique

Échantillons de tissu muqueux recueillis dans un milieu de transport anaérobie Les systèmes Anaerobe ATM ont été lavés deux fois avec du dl-dithiothréitol dans une solution saline avant l’homogénéisation du pilon dans une solution saline tamponnée au phosphate stérile dans une chambre anaérobie. Dilutions tissulaires homogénéisées – μL chacune ont été inoculées sur gélose BRU et BBE et – des colonies par échantillon ont été testées pour le gène bft et expansées sur TSA comme ci-dessus. Des unités CFU ont été obtenues à partir de BBE agar. Sauf indication contraire, les données des procédés de traitement ont été combinées pour présentation parce que les résultats ne différaient pas; P = [test de McNemar]; données non montrées En moyenne, un total de colonies par patient a été analysé pour le gène bft pour les deux cas et les témoins voir aussi la section « Résultats »

Analyse de la réaction en chaîne de la polymérase bft

Les colonies des plaques TSA ont été bouillies et le surnageant a été utilisé comme matrice d’ADN pour l’amplification en chaîne par polymérase. PCR amplification évaluant les régions -bp et / ou -bp des réactions PCR du gène bft utilisées Platinum PCR SuperMix Life Technologies Corporation et μM de forward et reverse amorces selon le protocole sur un thermocycleur Applied Biosystems Supplementary Data Les produits de PCR ont été évalués sur des% de gels d’agarose à bas point de fusion et colorés au bromure d’éthidium.

bft Isotype Identification

Des produits de PCR de colonies bactériennes positives ont été purifiés en utilisant le protocole QIAquick PCR Qiagen et séquencés Genewiz, Inc pour déterminer les isotypes bft. Des séquences ont été criblées avec BLASTN contre la base de données nucléotidique du National Center for Biotechnology Information, et l’isotype a été vérifié à% identité et couverture

Analyses statistiques

Les patients ont été considérés comme positifs pour le VIH si au moins une colonie bactérienne provenant d’un échantillon de tissu était positive. Les caractéristiques du patient ont été comparées en utilisant un test t non apparié, un test exact de Fisher ou un test as approprié. comparé en utilisant, le cas échéant, le test exact de McNemar, or ou Fisher. Le nombre d’UFC entre les cas et les témoins a été analysé en utilisant le test U de Mann-Whitney et les isotypes bft entre un sous-ensemble de cas et les contrôles avec test χ Prism et GraphPad InStat et P & lt; défini comme significatif

RÉSULTATS

Caractéristiques du patient

Un total de cas d’adénomes et adénocarcinomes patients, adénomes; patients, CRC et adénome et contrôles ont été étudiés Tableau, Données supplémentaires Les âges médians et la répartition par sexe étaient similaires entre les cas et les témoins Les cas étaient significativement plus souvent blancs, comparés aux témoins qui étaient plus souvent afro-américains. ,% / provenaient du côlon gauche La plupart des témoins n = [%] subissaient un dépistage du cancer colorectal, avec% ayant des biopsies du côlon droit et gauche obtenues. Données supplémentairesDans de nombreux cas, patients% avaient MBP-Abx quelques heures avant leur utilisation,% MBP, et% avaient MBP-No Abx Tableau Parmi les témoins,% ont rapporté des antécédents d’exposition aux antibiotiques dans les mois précédant leur intervention, avec% / notification des antibiotiques dans les mois suivant la coloscopie. Seuls les patients ont pris des antibiotiques au moment de la coloscopie

Bft est plus fréquente dans les échantillons muqueux des cas que des contrôles

Ainsi, nous avons analysé des colonies individuelles de Bacteroides à partir de plaques BBE pour le gène bft afin de détecter la positivité de la Bft. L’exposition aux antibiotiques pourrait perturber la détection de la Bft. Notre analyse initiale a révélé un effet marqué de MBP-Abx sur la récupération bactérienne Parmi les cas de MBP-Abx n =,% des tumeurs ou des échantillons de côlon normaux appariés n’ont pas mis en culture de bactéries par rapport à aucune échantillons de cas sans antibiotiques n =; Tableau et, similairement, les CFU des espèces Bacteroides médian étaient significativement plus faibles dans les échantillons des cas MBP-Abx UFC / échantillon; intervalle interquartile [IQR], – × vs cas sans antibiotiques × UFC / échantillon; IQR, × – × test U de Mann-Whitney, P & lt; ; Données supplémentaires En accord avec ces données, le nombre de cas positifs pour la Bft était significativement plus faible chez ceux qui ont reçu MBP-Abx% vs%; P = En revanche, la positivité en Bft était similaire chez les témoins, quelle que soit l’exposition aux antibiotiques rapportée Tableau Les témoins qui ont rapporté l’utilisation actuelle des antibiotiques étaient tous les deux positifs pour le bft. Les témoins à trois% n’avaient aucune croissance bactérienne; aucun signalé d’exposition aux antibiotiques Tableau Cas et contrôle bft Statut par single Bacteroides Colony Analysis Patients Casesa Contrôles P Valeur Totale Non Abxb MBP-Abx P Valuec Total Non Abx Abx P Valuec Total Non Non bft% Gauche Non Non bft% Droite Non Non bft% P valeure Patients Casesa Contrôles P Valorisés Total Non Abxb MBP-Abx P Valuec Total Non Abx Abx P Valuec Total Non Non bft% Left-sided Non Non bft% Right-sided Non Non bft% P valuee Cas ou contrôle positivité bft est basé sur des colonies simples combinées de bouillon direct et de bouillon provenant de plaques BBE Données supplémentaires; toutes les valeurs P ont été calculées avec le test exact de Fisher. Notez que les cas du côté gauche et du côté droit ne sont pas égaux aux cas totaux; les patients avaient à la fois une tumeur gauche et droite et sont représentés dans les deux catégories. Voir les abréviations du tableau: Abx, antibiotiques; BBE, Bacteroides bile esculine agar; MBP-Abx, préparation intestinale mécanique avec des antibiotiques oraux; MBP-No Abx, préparation intestinale mécanique sans antibiotiques orauxa Les spécimens de cas incluent l’analyse des patients avec adénomes n = ou carcinomes n = et leurs tissus normaux appariés Les données P supplémentaires ont été calculées en utilisant le test exact de Fisher. Les cas de données supplémentaires No Abx comprennent MBP-No Abx et No Prep voir Tableau c MBP-Abx vs No Abx groupes pour les cas; Groupes Abx vs No Abx pour controlsd Contrôles totaux vs No Abx casese Côté gauche vs côté droit

Comme l’exposition aux antibiotiques n’a pas modifié les résultats de Bft chez les témoins, nous avons ensuite comparé tous les cas de MBP-No Abx à tous les témoins. Cette analyse a suggéré que les cas étaient plus souvent positifs que les témoins% vs%; P =; La figure A; Tableau Fait important, la positivité de la BFT n’a pas différé selon la race dans les cas blancs,% vs Afro-américains,%; P = et témoins blancs,% vs afro-américains,%, P = Une stratification supplémentaire par tumeurs du côlon gauche et du côlon droit a révélé une association significative de la détection de Bft dans les cas comparés aux biopsies de contrôle gauche et droite correspondantes P = et P = respectivement; Figure A, Tableau Tous les cas d’adénomes tubulovillosés enlevés chirurgicalement étaient positifs par rapport à la bft tandis que chez les témoins, le statut bft positif ne différait pas entre individus avec n = [%] ou sans n = [%] petits adénomes tubulaires enlevés à la coloscopie. , P =; DataB supplémentaire Figure Vue largeDownload slideCase et contrôle de l’état bft A, globalement, cas n =; aucun antibiotique n’était plus souvent positif que les témoins n =; P = bft positivité était présent significativement plus souvent dans les cas de néoplasie recto-verso gauche et droite par rapport aux biopsies du côlon gauche et droite des contrôles Fisher test exact, P = et P =, respectivement B, Patients atteints de cancer colorectal CRC n =; aucun antibiotique n’a été stratifié par stade tumoral précoce, stade I / II; et tard, stade III / IV Tous les patients CRC en phase terminale% étaient positifs par rapport à% de tous les témoins et% de témoins sans adénomes Test exact de Fisher, P = et P =, respectivement Les cas d’adénomes ont été exclus de cette analyse. largeDownload slideCase et contrôle de l’état bft A, globalement, cas n =; aucun antibiotique n’était plus souvent positif que les témoins n =; P = bft positivité était présent significativement plus souvent dans les cas de néoplasie recto-verso gauche et droite par rapport aux biopsies du côlon gauche et droite des contrôles Fisher test exact, P = et P =, respectivement B, Patients atteints de cancer colorectal CRC n =; aucun antibiotique n’a été stratifié par stade tumoral précoce, stade I / II; et tard, stade III / IV Tous les patients CRC en phase terminale% étaient positifs par rapport à% de tous les témoins et% de témoins sans adénomes Test exact de Fisher, P = et P = respectivement Les cas d’adénomes ont été exclus de cette analyse

Une limitation potentielle est le nombre de colonies qui ont été examinées dans les cas et les témoins. Une médiane de IQR, – colonies de cas et IQR, – de contrôles a été examinée test U de Mann-Whitney, P =; Données supplémentaires A Cependant, lorsque les colonies individuelles évaluées par échantillon de tissu ont été corrigées pour la taille de tissu mm, le nombre de colonies testées dans les témoins était approximativement plus élevé que pour les tests Mann-Whitney U, P & lt; ; DataB supplémentaire, suggérant une possible sous-représentation des résultats dans les cas Malgré ce biais potentiel, une fréquence de Bft significativement plus élevée a été détectée dans les cas MBP-No Abx par rapport aux témoins dans le côlon droit et gauche.

La majorité des échantillons de tissus appariés sont tous deux bft-positifs

Ensuite, nous avons analysé si la détection bft différait entre la tumeur et les paires de tissus normaux des cas MBP-No Abx ou entre les paires biopsie coloscopie droite et gauche au sein d’un seul contrôle. paires de biopsie droite / droite Parmi les paires tumeur / normale,% paires de tissus étaient toutes deux positives en%, seul l’échantillon tumoral ou normal était positif, alors que chez les paires% bft n’était pas détecté dans les deux échantillons. à partir des témoins,% de paires de biopsies étaient toutes les deux positives à la bft; en% des paires, seule la biopsie gauche ou droite était bft-positive; et en% paires, les deux étaient bft-négatifs La fréquence de détection de Bft sur les tumeurs vs les tissus normaux dans les cas ou les biopsies du côlon droit vs gauche chez les témoins ne différaient pas Test de McNemar, tumeur vs normale, P =; biopsies droite / gauche, P = Une analyse du pourcentage médian de colonies positives a révélé une tendance non significative P =, avec le nombre le plus élevé de colonies positives détectées sur les tumeurs et le plus faible sur les biopsies témoins,%; apparié normal,%; Au total, ces données suggèrent que la présence de la muqueuse bft n’est pas limitée aux tumeurs mais s’étend sur une plus grande partie de la muqueuse colique.

Les patients atteints d’un CCR de stade tardif ont une détection de la Bft plus élevée que les patients CRC au stade précoce

Nous avons examiné si la prévalence de la Bft différait selon le stade du cancer chez les patients atteints de MBP-No Abx CRC stade précoce [stade I / II] vs stade avancé [stade III / IV]; Tableau Tous les patients atteints d’un CCR à un stade avancé% étaient positifs par rapport au% des patients CRC au stade précoce P =; Figure B Comparée au taux bft positif global dans les contrôles% ou dans les témoins sans adénomes tubulaires détectés lors de la coloscopie n = [% bft], la détection bft était significativement plus élevée chez les patients CRC en phase terminale P = et P =, respectivement

Plusieurs isotypes bft sont présents dans des échantillons de cas muqueux

D’un sous-ensemble de patients cas [n = CRC; n = adénomes] et témoins, les produits de PCR monoclonaux bft ont été purifiés et séquencés pour identifier l’isotype bft. Au total, les colonies positives pour le bft ont été séquencées à partir des cas et des témoins, respectivement Globalement, bft- était l’isotype le plus couramment identifié la muqueuse du côlon dans les deux cas% et contrôles% P =; Tableau De multiples isotypes bft, le plus souvent bft- et bft-, ont été détectés significativement plus souvent dans les cas% que chez les témoins% P =; Tableau Tableau Détermination de l’isotype bft par analyse de séquence des amplicons de réaction en chaîne de la polymérase bft Isotype Statut Casesa Contrôles Patients Isotype simple bft- bft- bft- Mutiple isotypesb bft- et – bft- et – bft- et – bft-, – et isotype global frequencyc bft- bft- bft- Colonies simples bft- bft- bft- bft Isotype Statut Casesa Contrôles Patients Isotype simple bft- bft- bft- Mutiple isotypesb bft- et – bft- et – bft- et – bft-, – et – Overall isotype frequencyc bft- bft- bft- Colonies simples bft- bft- bft- Les données sont présentées en tant que non% Abréviation: MBP-Abx, mechanica Préparation de l’intestin avec des antibiotiques orauxa Comprend les cas de MBP-Abx qui ont produit des bactériémies Les cas ont eu plusieurs isotypes de Bft détectés par rapport aux témoins. Test exact de Fisher, P = cbft- était l’isotype le plus commun et ne différait pas entre les cas et les témoins. = Les nombres représentent les patients avec isotypes simples et multiples Total des colonies isolées à partir de cas ou de témoins; la distribution des isotypes n’était pas différente χ test d’indépendance, P = les nombres représentent les colonies isolées totales qui sont bft

DISCUSSION

Les résultats montrent que l’isotype de la muqueuse est le plus commun. En outre, les cas ont significativement plus souvent eu plusieurs isotypes de la BFT par rapport aux témoins. , une observation non rapportée auparavant chez l’homme Dans des travaux antérieurs, environ% de souches ETBF fécales abritaient bft- comparé à environ% bft- et environ% bft- [,,,] Dans une étude préalable de patients CRC, le sous-typage ETBF fécal a également révélé bft-% prédominant, pas significativement différent des témoins bft-,% Notamment, BFT- a plus de puissance et d’activité biologique in vitro et in vivo comparé au BFT- et, dans les données préliminaires, est plus cancérigène chez les souris MinApc / – Wu et Sears, données non publiées Collectivement, cela suggère que les taches exprimant la bft présentent une meilleure adhérence de la muqueuse et un potentiel carcinogène par rapport aux souches bft, ce qui confirme le rôle de L’initiation et / ou la progression de l’étude CRCOur chez l’homme diffèrent à la fois par les caractéristiques des patients et les méthodes de microbiologie comparées aux travaux antérieurs sclérose en plaques. Zitomersky et al ont détecté ETBF fécaux en% / d’adultes sains d’âge moyen, ayant en moyenne Bacteroidales analysés par échantillon de selles; bft a été détecté en% / de tous les isolats de B fragilis Les travaux ultérieurs de ce groupe, en revanche, ont identifié un ETBF muqueux chez seulement% des patients atteints de MICI, âge moyen – ans; n = et contrôle l’âge moyen, années; n = et environ% / de tous les isolats Nous avons étudié un âge médian de la population âgée, années et analysé plusieurs échantillons de muqueuse par patient moyen, colonies / patient Une différence de méthodologie critique peut être notre utilisation de l’ATM avant l’homogénéisation et le placage des échantillons dans un capot anaérobie Cette détection de bft a été nettement améliorée% positivité bft sans ATM vs% bft positivité avec ATM, P =; En général, la détection de BFT muqueuse utilisant notre méthodologie de colonie unique était significativement plus élevée% de contrôles et% de tous les isolats examinés Dans notre étude, bft était détecté dans la majorité des tumeurs réséquées chirurgicalement et était uniforme dans les CRC tardifs, probablement dû La colonisation gastrique par Helicobacter pylori diminue avec le cancer gastrique par rapport à une maladie antérieure, car le tissu métaplasique semble moins hospitalier pour H pylori Des données récentes suggèrent que B fragilis colonise préférentiellement les cryptes épithéliales du côlon et, par conséquent, L ‘accumulation de souches de ETBF dans les cryptes au cours du temps exprimant différents isotypes de Bft peut améliorer la cancérogenèse. L’ ETBF induit un début rapide de colite IL – dépendante chronique et de formation de tumeurs chez les souris MinApc /. foyers d’activation persistante de Stat et espèces réactives de l’oxygène avec dommages à l’ADN, pote nt médiateurs de l’oncogenèse Nous postulons que l’exposition bft dans le côlon humain peut induire une inflammation chronique, peut-être focale, de la muqueuse donnant des sites sujets à la mutagenèse et à la carcinogenèse de l’ADNIl y a plusieurs considérations importantes pour interpréter ces résultats. la chirurgie réduit significativement la récupération des échantillons chirurgicaux et limite, avec le temps, notre capacité à obtenir des échantillons tumoraux MBP-No Abx en raison des directives sur la prophylaxie antibiotique de la chirurgie colorectale publiées récemment Dans les études futures, les échantillons prélevés par coloscopie avant la chirurgie peuvent aider à Deuxièmement, nous avons analysé un nombre significativement plus élevé de colonies par zone tissulaire chez les témoins, et les spécimens chirurgicaux ont été exposés à l’air plus longtemps que les biopsies témoins. Ces problèmes pourraient avoir biaisé nos résultats en matière de sous-représentation. comme ceux rapportés par Zitomersky et al, où la dilution L’alyse a été réalisée Malgré ces limites, nos cas étaient encore plus souvent positifs que nos témoins de l’étude. Une attention accrue est portée sur la compréhension des contributions des bactéries coliques telles que l’ETBF à la dysbiose colique et au CRC humain. Nos résultats ne définissent pas l’exposition à la toxine BFT biologiquement active. De plus, nous n’avons pas confirmé que la détection de Bft était confinée à B fragilis sensu stricto comme dans les travaux antérieurs, ni défini De nombreuses questions importantes demeurent pour comprendre la relation entre l’exposition Bft et la pathogenèse du CRC, comme déterminer si la détection de B fragilis et de Bft dans les muqueuses et les fèces est corrélée, qu’il s’agisse d’inflammation du côlon ou non. corrèle avec la détection de Bft, et / ou une réponse anticorps anti-BFT systémique Une recherche est nécessaire pour comprendre si l’âge, le sexe, la race et / ou l’alimentation affectent la détection de la Bft dans les populations humaines au fil du temps

Remarques

Remerciements Nous remercions Katharine Romans, MS, pour ses précieuses contributions à la collecte d’échantillons. Soutien financier Ce travail a été soutenu par les numéros de subvention R CA à C L S et D M P des National Institutes of Health; K DK à E C W; T CA- à E M H; et P CA [GI SPORE]; le numéro de subvention Johns Hopkins Alexander et Margaret Stewart Trust; l’Organisation néerlandaise de recherche scientifique attribue le numéro NWO à A B; Tous les auteurs: Aucun conflit d’intérêt potentiel. Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits potentiels de conflits d’intérêts que les éditeurs considèrent comme pertinents pour le contenu de l’ICMJE. le manuscrit a été divulgué